非洲猪瘟检测仪-山东天合环境科技有限公司

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非洲猪瘟病毒间接 ELISA 抗体检测试剂盒

产品型号:

产品价格: 价格面议元

产品品牌:天合

非洲猪瘟病毒间接 ELISA 抗体检测试剂盒用于检测血清样品中的非洲猪瘟病毒抗体水平。
产品详情

非洲猪瘟抗体 ELISA 检测试剂盒 CAT.#E25

1.用途

用于检测血清样品中的非洲猪瘟病毒抗体水平。

2. 原理简介 

本试剂盒采用间接 ELISA 法检测血清中的非洲 猪瘟抗体。其基本原理如下:用重组蛋白抗原制备包 被微孔板,HRP 酶标记物为抗猪 IgG。检测时,向微 孔板中加入稀释后的待测样品,洗板后,加入 HRP 标记抗体,如果血清中含有非洲猪瘟抗体,则抗体会 与酶标板上的包被的抗原结合,酶标抗体也会与血清 中的非洲猪瘟抗体结合,加入底物后,颜色反应的深 浅与样品中存在的非洲猪瘟抗体的量成正比。 

3. 试剂盒组份 

1). 包被板:96T(12 条8 孔,2 块)。

2). 酶标记物:21.0ml/瓶,1 瓶。

3). 样品稀释液:100.0ml/瓶,1 瓶。含蛋白的缓冲液, 可作为阴性质控使用。

4). 阳性质控:1.0ml/瓶,1 瓶。含有非洲猪瘟抗体。

5). 洗液:60.0ml/瓶,1 瓶。20 倍浓缩液,用前稀释。 含有非离子去垢剂。 

6). 底物 A:14.0ml/瓶,1 瓶。含有过氧化氢的缓冲 液。

7). 底物 B:14.0ml/瓶,1 瓶。含有 TMB 的缓冲液。

8). 终止液:14.0ml/瓶,1 瓶。含有硫酸的缓冲液。

9). 板贴、说明书、自封袋:1 套。

4. 注意事项

1). 不同批次的组份不可混用,且只能在效期内使 用。

2). 如果待检标本含有悬浮物、絮状物等不溶物,请 离心去除。且含有叠氮钠的标本不可用。

5. 试剂准备

1). 测试前将试剂盒组份置于室温(18-25℃)平衡 30 分钟,测试后应立即放回 2-8℃保存。 

2). 洗涤液:将浓缩洗液按照 20 倍比例用蒸馏水稀 释,混匀后备用。 

3). 样品准备:按照常规方法制备血清,用试剂盒中 配套的稀释液稀释,样品按照 1:100 稀释。(比 如:5µl 样品加入到 495µl 样品稀释液中) 

6. 检测步骤 

1). 取出所需要的板条。剩余的板条装入自封袋中, 置于 2-8℃保存。 

2). 先向每孔中加入 100µl 稀释后的待测样品、阴性 质控(样品稀释液)、阳性质控(不稀释),其中 阴性质控重复加两孔,阳性质控重复加两孔。 

3). 轻轻震动 10-20 秒混匀,贴上板贴。 

4). 置于 37℃温育 30 分钟。扣除孔中液体,并用洗 液洗涤 5-7 次。在干净的纸巾或毛巾上拍干,尽 量去除残留的水分。 

5). 每孔中加入 100µl 的酶标记物,轻轻震动 10-20 秒混匀,贴上板贴。 

6). 置于 37℃温育 30 分钟。扣除孔中液体,并用洗 液洗涤 5-7 次。在干净的纸巾或毛巾上拍干,尽 量去除残留的水分。 

7). 每孔依次加入 50µl 底物 A 和 50µl 底物 B,轻轻 震动 10-20 秒,置于 37℃避光反应 15 分钟。 

8). 每孔加入 50µl 终止液,轻轻震动几次混匀。使 蓝色液体完全变为黄色液体。

9). 在 10 分钟内,测量 450nm 处的吸光度(OD450)。 

7. 结果判断 

1). 阴阳性质控平均值计算 阳性质控平均值 =(阳性质控 1+阳性质控 

2)/2 阴性质控平均值= (阴性质控 1+阴性质控 2)/2 2). 实验有效性判定:应满足, 阳性质控平均值 – 阴性质控平均值0.500 阴性质控平均值0.400 

3). 样品 S/P 值计算: S/P=(样品 A- 阴性质控平均值)/(阳性质控平均 值 – 阴性质控平均值) 

4). 结果判定: 1 阴性:S/P0.20; 2 阳性:S/P0.20。 

8. 储存条件及效期 

2-8℃保存,有效期为 12 个月。


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